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Hieff™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶
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Hieff™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶
Hieff™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶
  • 市场价格:¥186.00
  • 销售价:¥155.00

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本商品仅供科研之用,不可用于临床

1

商品详情

规格参数

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相关商品

参考文献

Hieff™ Taq DNA Polymerase DNA聚合酶


产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

Hieff® Taq DNA Polymerase  DNA聚合酶

10101XY80

1000 U

-20℃

155.00

Hieff®Taq DNA Polymerase  DNA聚合酶

10101XY90

5×1000 U

-20℃

735.00


产品描述

Hieff®Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶,分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA,可直接用于TA克隆。


产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10101XY80(1000 U)

10101XY90(5×1000 U)

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

1 mL×4

1 mL×20

10101-B

25 mM MgCl2

1 mL×2

1 mL×10

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

200 μL

200 μL×5


产品应用

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。


活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。


质量控制

核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ,74℃下孵育1 h,DNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA,74℃下孵育1 h,DNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。


运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存。


注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作


PCR反应体系(冰上配制)

组分

体积(μL)

终浓度

ddH2O

to 50

-

10×Taq Buffer(Mg2+ Free)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dNTP Mix (10 mM each)

1 μL

0.2 mM

模板DNA

optional

-

引物1(10 μM)

2 μL

0.4 mM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4 mM

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04 U/μL

注:

1)Mg2+ 终浓度Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM,如有需要,可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。

2)聚合酶添加:室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,为了防止非特异性扩增,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中

3)聚合酶浓度:推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。

4)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50 ng~100 ng

质粒DNA

10 pg~20 ng

cDNA

1~5 μL(不超过反应体系的1/10)


PCR扩增程序

循环步骤

温度(ºC

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec


退火

50-60

30 sec

35

延伸

72

60 sec/kb


终延伸

72

10 min

1

注:

1)预变性温度和时间:推荐使用94℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。

2)退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。


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产品名称

货号

规格

促销价(元)

Hieff™ Taq DNA Polymerase Taq DNA聚合酶

10101XY80/90

1000U/5000U

155/735

2×Hieff™ PCR Master Mix (With Dye) HOT

10102XY08

5ml

150

2×Hieff™ PCR Master Mix (No Dye)

10103XY08

5ml

150

2×Hieff® Robust PCR Master Mix (With Dye)

10106XY03

1ml

65

HB180819


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