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2×RAPA3G Multiplex PCR Mix XY9A0610

2×RAPA3G Multiplex PCR Mix

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2×RAPA3G Multiplex PCR Mix

描述:

Multiplex PCR 又称多重 PCR,是指在同一 PCR 反应体系里加上两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR 反应,已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等多个领域,特别适用于微量样本的多位点检测。 

本制品使用具有极强扩增性能的热启动 RAPA3G DNA聚合酶和优化的多重 PCR 反应缓冲液,使其可有效扩增 20重以上的 PCR,具有极高的灵敏度,最大程度上减少了反应体系优化步骤。

特性 

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储存:长期储存置于-20°C 以下,可保存 2 年;短期使用置于 4°C(3 个月)保存。

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请注意:该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短,否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。 

3. 电泳:1kb 以内的扩增产物建议使用 3%~4% 琼脂糖凝胶,电压使用 80V,可以有效的分离各扩增片段。

4. 注意事项: 

(1)当模板 GC 含量>70%时,请添加 5×Q-Solution。 

(2)推荐引物设计原则:引物长度保持在 22 - 30 bp,扩增产物长度在 2kb 以下,GC 含量 50% - 60%,尽量减少各引物之间 TM 的差值。 

(3)检测单引物特异性:多重 PCR 反应前,应对设计的引物逐一扩增,以确定是否有非特异性扩增和扩增效率。 

(4)引物推荐使用浓度:推荐扩增片段<300bp 每条引物的反应终浓度为 0.2-0.3μM,扩增片段>300bp 每条引物的反应终浓度为 0.05-0.15μM,如某些目标片段产量偏低或偏高,可适度调整其对应引物使用量以优化反应结果。

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