南极热敏UDG

描述：

南极热敏 UDG 是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白。该酶能有效地水解单链或双链DNA 上的尿嘧啶，产生的缺嘧啶位点，在高温或高 pH下，极易水解断裂。该酶对 RNA 无活性，主要用于 PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热，经 95℃10min 处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性，导致含有dU碱基的PCR产物的降解。而来源于嗜冷海洋细菌的热敏型UDG在50℃ 5min即完全失活，在进行PCR扩增前，在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA糖基化酶（热敏性），25℃10min 即可消除以往 PCR 产物的残留污染，由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶（热敏性）在 PCR循环的 94℃变性一步便可被灭活，因此不会影响新的含dU 的 PCR 产物。

活性定义：在标准反应体系下，37°C 每分钟催化 60 pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。反应 Buffer：Heatlabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的，但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。 

酶储存液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。 

储存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反复冻融。 

热失活：50°C，10min。

2. 25℃孵育 10min。 

3. 正常启动 PCR 程序。

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