核酸外切酶I(Exonuclease I, E.coli)

描述：

该酶具有从 3’-5’ 方向降解单链 DNA 的外切酶活性，能够逐步释放脱氧核糖核酸 5'单磷酸，并留下完整的 5'端二核苷酸。该酶来源于携带有 E. coli exo I 基因的质粒，经重组表达纯化而得。该酶多用于 PCR 扩增后降解消化引物，该酶对于双链 DNA 和磷酰或乙酰基团封闭的 3’OH 末端 DNA 链无活性。

应用

从 PCR 混合物中去除引物 

PCR 产物测序之前用于在单管中使用大引物进行的PCR 诱变反应 

从核酸混合物中去除含有 3'羟基末端的单链 DNA 

检测含有 3'羟基末端的单链 DNA 的存在 

储存：-20℃可保存 3 年。 

活性定义：1 单位指在 37°C 条件下，30 分钟内催化释放10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。 

使用注意事项 

（1）1×ExoI Buffer：67mM Glycine-KOH pH 9.5，6.7mMMgCl2，10mM 2-巯基乙醇。该酶在常规 PCR Buffer 中也具有活性。 

（2）该酶的最佳反应温度为 37°C，80°C 20min 可失活。（3）该酶不能切割双链 DNA，因此含有二级结构的单链DNA 需要变性后才能完全消化。

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