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大肠杆菌SURE化学感受态细胞 XY91154CC

E. coli SURE chemical cells

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大肠杆菌SURE化学感受态细胞

产品及特点 本产品是采用大肠杆菌 SURE 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可直接用 于 DNA 的化学转化。本试剂盒具有下列特点:

1. 使用 pUC19 质粒检测,转化效率可达 108,-80℃保存几个月转化效率不改变。

2. 主要用于克隆不稳定的 DNA 片段,如重复序列、Z-DNA 等。

3. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。

4. 大肠杆菌SURE菌株基因型是K-12,e14-(mcrA-), Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171, endA1, gyrA96, thi-1, supE44, relA1, lac, recB, recJ, sbcC, umuC::Tn5 (Kanr), uvrC。其基因型符号及其含义列表如下:

规格及成分

运输及保存 干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

自备试剂 目的 DNA、SOC 或 LB 培养基等

使用方法

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl,可以根 据实际情况分装使用。 以下实验以 50 μl 感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的 DNA(根据实际情况加入适 量的 DNA,通常 100 μl 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和),用 移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。

3. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。

4. 每个离心管中加入 450 μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基(不含抗生素),混匀后置于 37℃摇床,150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的 SOC 或 LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于 37℃直至液体 被吸收,倒置培养,37℃培养 12-16 小时。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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