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大肠杆菌DH5α化学感受态细胞 XY91155CC

E. coli DH5 alpha chemical cells

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大肠杆菌DH5α化学感受态细胞

产品及特点 本产品是采用大肠杆菌 DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于 DNA 的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15 基因产物可与载体编 码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α 互补,可用于蓝白斑筛选。recA1 和 endA1 的突变有利 于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。使用 pUC19 质粒检测,转化效率可达 108, 适用于高效的质粒 DNA 克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。 本菌种来源于 Hoffman-Berling 1100 菌种,具有下列特点:

规格及成分

运输及保存 干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

使用方法

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl,可以根据 实际情况分装使用。 以下实验以 50 μl 感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的 DNA(根据实际情况加入适量 的 DNA,通常 100 μl 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和),用移液器 轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。

3. 42℃热击 45 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。

4. 每个离心管中加入 450 μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床,150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的 SOC 或 LB 固体 琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于 37℃直至液体被吸收, 倒置培养,37℃培养 12-16 小时。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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