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DiSC3(5) 3,3'- 二丙基硫杂二羰花青碘化物 XY22076-100mg

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DiSC35)说明书

规格:100mg

CAS53213-94-8

中文名:3,3'- 二丙基硫杂二羰花青碘化物

英文名:DiSC3(5)  (3,3'-Dipropylthiadicarbocyanine Iodide) Benzothiazolium, 3-propyl-2-(5-(3-propyl)-2(3H)-benzothiazolidene-1,3-pentadienyl), iodide

结构式:

2021101304343862221

分子式:C25 H27 IN2 S2

分子量:546.53

Ex(nm)660

Em(nm)675

溶剂:DMSO

储存条件:-20干燥避光保存,有效期一年。

DiDDiODiIDiR DiS 细胞膜染料

产品说明:

DiDDiODiIDiRDiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光)DiO(绿色荧光)DiD(红色荧光)DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiIDiO可以分别用标准的 FITCTRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。

使用方法

1. DiDDiODiIDiRDiS细胞膜染色液制备

(1)配置DMSOEtOH 储存液:储存液用 DMSO EtOH 配置浓度15 mM

  注意:未使用的储存液保存在-20,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 µM的工作液。

  注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。

2. 悬浮细胞染色

  (1)悬浮细胞密度为 1×106/mL加入到工作液中。

  (2)37培养细胞 220分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

  (3)染色细胞试管在10001500转离心5分钟。

  (4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37的培养液。

  (5)重复(3)(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

  (1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

  (2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

  (3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

  (4)37 培养细胞 220分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

  (5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养510分钟,然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

  (1)DiDDiODiIDiRDiS滤光器的选择参见表1

  (2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

  a) DiIDiO=Omega XF52Chroma 51004;

  b) DiIDiD=Omega XF92Chroma 51007;

  c) DiIDiODiD=Omega XF93Chroma 61005

5. 流式细胞仪的检测

  DiDDiODiIDiRDiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1FL2FL3FL4流式细胞仪检测。

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