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大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞 XY91143CC

E. coli XL1 - Blue chemical cells

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大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞

产品及特点 本产品是采用大肠杆菌 XL1-Blue 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞, 可用于 DNA 的化学转化。该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增,能保证 高拷贝质粒的稳定复制;适合非甲基化 DNA 的转化。使用 pUC19 质粒检测, 转化效率可达 107。本感受态细胞具有四环素抗性。

菌株的基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac [F- proAB laclqZΔ M15 Tn10 (Tetr )]

规格及成分

运输及保存 干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

自备试剂 目的 DNA、SOC 或 LB 培养基等

使用方法

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl, 可以根据实际情况分装使用。 以下实验以 50 μl 感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的 DNA(根据实际情况 加入适量的 DNA,通常 100 μl 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。

3. 42℃热击 45 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。

4. 每个离心管中加入 450 μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基(不含抗生素),混匀 后置于 37℃摇床,150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的 SOC 或 LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于 37℃ 直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养 12-16 小时。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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